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试剂配制_遗传学实验指导

时间:2020-02-09百科知识联系我们
试剂配制_遗传学实验指导

四、试剂配制

(1)凝胶组成液:

A液:Tris柠檬酸缓冲液。称取15g Tris,1.25g柠檬酸,混合置于一烧杯中,加入一定量的蒸馏水(少于100 ml)将其溶解,再将溶液移入1000 ml的容量瓶中,调pH=8.9,定容至1000 ml。

B液:称取24g丙烯酰胺,用A液溶解,定容至100ml。

C液:称取0.75g甲叉丙烯酰胺,用A液溶解,定容至100ml。

D液:称取0.187g乙二胺四乙酸二钠,溶于15ml A液中。

E液:TEMED原液。

F液:称取0.4g过硫酸铵,溶于10ml蒸馏水中.

G液:称取10g丙烯酰胺和2.5g甲叉丙烯酰胺,溶于蒸馏水中,定容至100ml。

(2)电极缓冲液:

称取6.2g Tris和2g甘氨酸,溶于蒸馏水中,调pH=8.7,网神远控定容至100ml,用时稀释50倍。(www.anred.net.cn)

(3)样品匀浆液:

称取蔗糖1.5g,溴酚蓝0.01g,Triton100 0.05g,溶于10ml蒸馏水中。

以上溶液全部放入冰箱中0℃~4℃保存,F液用新鲜配制的或贮存期2周内的网神远控,其他溶液可贮存2个月。

(4)染色缓冲液(0.1mol/L磷酸缓冲液):

称取14.2g磷酸氢二钠,溶于蒸馏水中网神远控,用2mol/L的HCl调pH=6.5,定容至100网神远控0 ml。

(5)染色液:

称取0.1g的α-醋酸萘酯,0.1g的β-醋酸萘酯,0.1g的坚牢蓝RR,先用少量丙酮溶解,然后用0.1mol/L的磷酸缓冲液定容到100ml。

(6)脱色固定液:

水∶甲醇∶冰醋酸=5∶5∶1