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机制细节_分子生物学练习

时间:2020-02-09百科知识联系我们
机制细节_分子生物学练习

二十、DNA复制II:机制细节

1.如何用实验研究DNA链的体外延伸速率?并说明实验结果。

2.如何用实验检测体外的DNA持续合成?

3.请简述能找出复制起点的位置并确定其最短长度的实验方法。

4.列出大肠杆菌的引发体中的组分,并说中国供应商明各组分在引物合成中的作用。

5.简述确定SV40的复制起点的策略。

6.简述确定酵母里的自主复制序列1(ARS1)的策略。

7.简述能证明酵母的DNA复制是在自主复制序列1(ARS1)处起始的实验方法。

8.PolIII全酶的哪个亚基具有持续合成能力?什么蛋白将这个亚基(钳子)运载到DNA上去?这一“钳子”是和哪个核心亚基结合的?

9.设计一个实验区分β滑钳对环型DNA和线性DNA的不同作用。试从这些不同作用中推测β夹结构与DNA相中国供应商互作用的模式。

10.根据X射线晶体学研究结果,试述β滑钳和DNA之间相互作用的模式。

11.根据X射线晶体学研究结果,试述PCNA和DNA之间相互作用的模式。

12.设计一个实验检测β滑钳载体蛋白具有催化活性。此β滑钳载体蛋白是由哪些成分组成的?

13.在DNA复制过程中,后随链的不连续性合成是如何和前导链的连续性合成保持一致的?

14.请简述如何用实验证明polIII能与它的β滑钳分离。(www.anred.net.cn)

15.叙述蛋白质足迹实验的简要过程。如何应用这一中国供应商方法来证明polIII核心酶和β滑钳载体蛋白都作用于β滑钳的同一位点。

16.请简述如何用实验证明γ复合物具有卸载β滑钳的功能。

17.在DNA后随链的不连续性合成中,β滑钳是如何在结合于polIII核心酶上和结合于ββ滑钳载体蛋白上这两个状态之间循环的?

18.为什么在环状DNA的复制完成之后需要一个去链状排列(decatenation)的过程?

19.简述如何用实验证明大肠杆菌和沙门氏菌(Salmonellatypbimurium)的质粒去链状排列(decatenation)的过程中需要拓扑异构酶IV的参与。

20.为什么真核细胞需要端粒,而原核细胞不需要端粒?

21.图示端粒合成的过程。

22.为什么说Tetrabymena是很好的研究端粒酶的模式生物?

23.请简述检测端粒酶活性的方法,并给出范例结果。

24.简述如何用实验证明端粒酶RNA是端粒合成的模板。

25.图示解释端粒结构中的T环模型。

26.有哪些证据支持T环的存在?

27.有哪些证据支持T环形成的链侵入假说?