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加帽和加()_分子生物学练习

时间:2020-02-09百科知识联系我们
复旦大学bbs论坛 加帽和加()_分子生物学练习

十四、转录后事件II:加帽和加poly(A)

1.用3H-AdoMet和32P标记带帽的真核mRNA,再用碱消化,消化产物进行DEAE-celluose层析。用已知电荷的寡核苷酸marker显示洗脱的cap1。画出cap1的结构图,并解释它的表观带电性。

2.如何得知帽子中含有7-甲基鸟嘌呤?

3.简述加帽过程的步骤。

4.用实验证明加帽对RN复旦大学bbs论坛A稳定性的作用。

5.用实验证明加帽和加poly(A)过程对翻译的协同作用。

6.用实验证明加帽对mRNA转移到细胞质的作用。

7.用实验证实poly(A)的大小。

8.如何得知poly(A)是加在mRNAs的3ˊ端?

9.如何得知poly(A)是在转录后加上的?

10.用实验证明poly(A)对mRNA的可译性、mRNA稳定性和把mRNA招募到多聚核糖体中的作用。

11.画出加poly(A)的过程,从RNA将要延伸到poly(A)位点处开始。

12.用实验证明转录不是停止在poly(A)位点处。

13.用实验证明AAUAAApoly(A)序列的重要性。其他什么基序可以替换AAUAAA?相对于AAUAAA,这些序列位于何处?(www.anred.net.cn)

14.用实验证明G/U丰富和U丰富的poly(A)基序的重要性。相对于poly(A)位点,这些序列位于何处?

15.用实验证明RPB1CTD在加poly(A)序列之前对切割pre-mRNA的作复旦大学bbs论坛用。

16.将一段合成的poly(A)位点插入到兔β球蛋白基因大内含子处,加poly(A)过程将会发生什么变化?当这些内含子拼接被破坏时,加poly(A)过程会如何?如何解释这些结果?

17.用实验证明poly(A)多聚酶和特异因子CPSF的重要性。

18.实验题:在含有变化的AAUAAA基序的poly(A)底物末端加上40个A,会有什么结果?

19.用实验证明:CPSF结合AAUAAA,而非AAGAAA。

20.实验题:在有或没有oligo(A)的情况下,CPSF和PABII对含有AAUAAA或AAGAAA基序的底物加poly(A)过程的影响。如何解释结果?

21.作图示意加poly(A)的过程,并显示CPSF、切割酶复旦大学bbs论坛、poly(A)聚合酶、RNA聚合酶II、(PAP)和PABII的作用。

22.poly(A)聚合酶PAPI的哪部分为加poly(A)过程所必需的?给出证据。

23.用实验证明:胞质poly(A)元件(CPE)对于胞质加poly(A)过程是必需的。

24.用实验证明:帽子结构在pr复旦大学bbs论坛e-mRNA拼接第一个内含子过程中起重要作用。

25.用实验证明:poly(A)影响pre-mRNA最后一个内含子的拼接。