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真核聚合酶和它们的启动子_分子生物学练习

时间:2020-02-09百科知识联系我们
真核聚合酶和它们的启动子_分子生物学练习

九、真核RNA聚合酶和它们的启动子

1.画出DEAE-Sephadex层析中真核细胞核RNA多聚酶的洗脱图谱。如果在1μg/mL的α-鹅膏素存在的条件下分析细胞核RNA多聚酶,结果如何?

2.用实验证明:聚合酶I最先位于细胞核仁中。

3.RNA聚合酶I在低离子强度下活性最高,与Mg2+作用,并且位于核仁中。由此可以推出聚合酶I的产物会怎样?

4.如何得知聚合酶I产生大的rRNA前体,聚合酶II产生mRNA前体?简述一个简单的体外转录实验,以及教材中的实验。

5.用实验证明:聚合酶III产生tRNA和5SrRNA。

6.酵母RNA聚合酶II有多少个亚基?哪个是“核心”亚基?所用三种核RNA聚合酶一般有多少亚基?

7.怎样使用表位标签法一步提取酵母聚合酶II?

8.用实验证明:聚合酶II最大的亚基与DNA结合。

9.用实验证明:聚合酶II第二大亚基中含有催化核苷酸间形成磷酸二酯键的活性位点。

10.有何证据证明:真核聚合酶II的三个最大的亚基分别与原核RNA聚合酶的βˊ、β和α亚基同源?

11.当RPB4基因被删除后,RNA聚合酶II的结构如何变化?这个缺陷型聚合酶的功能是正常还是非正常?给出证据。

12.一些制备聚合酶II的实验表明,最大的亚基(RPB1)有三种不同的形式。给出这三种形式的名称,并指出其在SDS-PAGE中的相对位置。说明原因。

13.RPB1的CTD结构是怎样的?

14.列举证明聚合酶II的RPB1对α-鹅膏素敏感(或抗性)的一系列实验。(www.anred.net.cn)

15.简述电子和X光晶体学对酵母RNA聚合酶II及其延伸复合物的研究结果。

16.画出聚合酶II启动子草图,显示其可能包含的所有元件。

17.哪些基因倾向于含有TATA框?哪些基因倾向于不含TATA框?

18.II型转录开始于TATA框第一个碱基下游30bp处的鸟苷酸。如果删除TATA框与该鸟苷酸之间的10bp,再将该突变DNA转染细胞,转录是否依旧从该鸟苷酸开始?如果不是,从哪里开始?

19.从II型启动子中删除TATA框,最可能出现的两种结果是什么?

20.画图描述接头扫描(linker-scanning)过程。其结果可以提供什么信息?

21.列举II型启动子中的两个常见的上游元件。

22.画图描述一个典型的I型启动子。

23.I型启动子的元件是如何发现的?说出实验及结果。

24.用实验证明I型启动子元件间空间的重要性。

25.列表比较经典和非经典的III型启动子。分别给出一个具体例子。

26.简述对5SrRNA基因启动子的5’和3’端进行定位的实验及结果。

27.你认为位于基因上游的一段重复序列起增强子作用。设计实验证明假说。

28.解释:增强子活性具有组织特异性